在做慢病毒包裝實(shí)驗(yàn)中，有科研小伙伴常遇到：用同樣的病毒載體系統(tǒng)進(jìn)行病毒包裝實(shí)驗(yàn)，為什么有人做的很好，次次成功，有人卻是時(shí)常做不出來(lái)，穩(wěn)定性很差，不是滴度低就是沒(méi)有轉(zhuǎn)進(jìn)去?花費(fèi)了大量的時(shí)間和精力去找原因，實(shí)在是很心酸呢！

慢病毒包裝有幾個(gè)關(guān)鍵因素：細(xì)胞因素、載體系統(tǒng)、質(zhì)粒抽提純化情況

• 細(xì)胞因素

用低代數(shù)的細(xì)胞293T細(xì)胞非常重要?。‘?dāng)然也要保證細(xì)胞狀態(tài)特別好，沒(méi)有細(xì)微污染，鋪板均勻。飽滿狀態(tài)好的細(xì)胞才可以產(chǎn)生較高滴度的病毒哦！

• 載體系統(tǒng)

在實(shí)驗(yàn)中最常見(jiàn)的慢病毒載體系統(tǒng)有三質(zhì)粒系統(tǒng)、四質(zhì)粒系統(tǒng)，當(dāng)然使用三質(zhì)粒系統(tǒng)的小伙伴居多，一定要選擇成熟商業(yè)化的載體系統(tǒng)！

• 載體構(gòu)建和質(zhì)粒抽提純化

我們要注意是否構(gòu)建時(shí)導(dǎo)致質(zhì)粒載體重組或某個(gè)部件缺失，或污染別的質(zhì)粒、雜物?中抽純化是否污染?要養(yǎng)成同時(shí)做陰性對(duì)照的習(xí)慣：建議目的基因載體和陰性對(duì)照GFP 載體是同一批，且建議每次包裝都如此操作，要保證目的基因的表達(dá)載體構(gòu)建純化良好，質(zhì)粒間比例得當(dāng)，并且對(duì)質(zhì)粒進(jìn)行酶切驗(yàn)證。

• 細(xì)胞轉(zhuǎn)染

如果以上都沒(méi)有問(wèn)題，那么最最最重要的環(huán)節(jié)就是慢病毒質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞了，轉(zhuǎn)染效果直接影響著出毒效率，那么一款好的轉(zhuǎn)染試劑在此時(shí)就是至關(guān)重要了！在這里給大家推薦一款性價(jià)比超高的轉(zhuǎn)染試劑，美國(guó)Polysciences家的PEI MAX 40K！

PEI MAX 40K（也稱為游離堿PEI 22K）是一種功能強(qiáng)大，值得信賴且經(jīng)濟(jì)高效的瞬時(shí)轉(zhuǎn)染試劑。在HEK293和CHO表達(dá)系統(tǒng)中，能在96孔板至100L生物反應(yīng)器范圍內(nèi)提供始終如一高效的基因表達(dá)。越來(lái)越多的研究人員和公司使用PEI來(lái)替代其他類型轉(zhuǎn)染試劑，以獲得他們所需要的優(yōu)勢(shì)。相較于其他類型轉(zhuǎn)染試劑，使用自行制備的PEI轉(zhuǎn)染試劑可以使總轉(zhuǎn)染成本降低高達(dá)40％左右。

Thomas M，et al（2005）研究數(shù)據(jù)表明，去乙?；?strong>PEI40000（Polyethylenimine MAX40000）體外質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染效率提高21倍，小鼠體內(nèi)靶向效率達(dá)到10000倍，隨之肺部特異療效顯示增強(qiáng)1500倍。

這么好的效果，你一定知道美國(guó)Polysciences公司！

美國(guó)Polysciences公司是一家成立于1961年，致力于特殊技精細(xì)化學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)品，單/多聚體等產(chǎn)品的研發(fā)供應(yīng)，所提供的產(chǎn)品服務(wù)于組織學(xué)（顯微技術(shù)）、生物技術(shù)、電子技術(shù)、護(hù)理及制藥工程等多個(gè)領(lǐng)域。起初為電子顯微鏡提供納米級(jí)樣本制備方案，幫助科學(xué)家揭示未知領(lǐng)域。隨后，開(kāi)拓了在病理（組織研究）應(yīng)用產(chǎn)品，使組織除了石蠟包埋外，還能夠包埋在塑料塊中；開(kāi)發(fā)染料和染色劑，以實(shí)現(xiàn)更好的樣品觀測(cè)方式。與政府機(jī)構(gòu)合作，開(kāi)發(fā)了用于診斷試劑盒應(yīng)的聚合物微球。與美國(guó)國(guó)家癌癥中心合作，開(kāi)發(fā)天然產(chǎn)物分離和純化產(chǎn)品，并用于紫杉醇的初步臨床試驗(yàn)。繼而開(kāi)發(fā)出超順磁珠，用于DNA、蛋白質(zhì)和肽的研究。Polysciences的高純度單體和聚合物產(chǎn)品在醫(yī)療器械中有許多應(yīng)用，并不斷開(kāi)發(fā)和增強(qiáng)其性能。公司秉承為應(yīng)用而研發(fā)，目前已擁有超過(guò)3000種產(chǎn)品。

質(zhì)量保證

• 遵循ISO 13485質(zhì)量管理認(rèn)證
• 獲得美國(guó)FDA有效注冊(cè)
• 遵守良好生產(chǎn)規(guī)范（cGMP）
• 獲得管理系統(tǒng)CSMS認(rèn)證
• 特種化學(xué)行業(yè)公認(rèn)的代言人

功能強(qiáng)大、經(jīng)濟(jì)實(shí)惠、安全可靠

這么好的轉(zhuǎn)染試劑，難道你不心動(dòng)嗎？

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經(jīng)過(guò)幾年的不懈努力，華雅思創(chuàng)生物提供的產(chǎn)品覆蓋免疫細(xì)胞治療、干細(xì)胞治療、干細(xì)胞基礎(chǔ)研究、動(dòng)物模型疾病研究、基因檢測(cè)（NGS）、試管嬰兒、產(chǎn)品質(zhì)控等諸多熱點(diǎn)科學(xué)研究領(lǐng)域。如今，華雅思創(chuàng)已經(jīng)成為L(zhǎng)ifeline、Takara、Origen、Corning、BD、Peprotech、illumina、BECKMAN、LONZA、CellGenix、Stemcell、Labobanker2、Gibco、StemRD、PreAnalytiX、Irvine Scientific、eBioscience、CSTI等五十余家國(guó)際知名企業(yè)代理商，為中國(guó)廣大科研伙伴提供全面解決方案！

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