產(chǎn)品英文名稱：Pichia pastoris 2nd Generation HCP ELISA kit
產(chǎn)品中文名稱：畢赤酵母第二代 HCP 試劑盒

Pichia pastoris 2nd Generation HCP ELISA kit 的應(yīng)用
本試劑盒是用于確定在畢赤酵母中的重組表達(dá)的宿主細(xì)胞生產(chǎn)的產(chǎn)品的畢赤酵母蛋白污染的存在。Cygnus賣畢赤酵母HCP檢測(cè)的兩種ELISA試劑盒。原盒F140，有一個(gè)非常廣泛的反應(yīng)性的肽表位，此外，還有一個(gè)小群體的抗體識(shí)別的抗原表位的畢赤酵母的糖基化。在重組蛋白產(chǎn)品同時(shí)糖化，有交叉反應(yīng)情況下，可以導(dǎo)致在真正的hcp或不定的hcp濃度由于樣本稀釋線性估計(jì)潛在的缺乏。用F640試劑盒用的抗體是與F140試劑盒相同的多克隆抗體是除了已經(jīng)承受額外的親和吸附去除抗體的糖基化表位。該試劑盒是用于研究和制造使用，不用于人類或動(dòng)物的診斷應(yīng)用。

畢赤酵母第二代 HCP 試劑盒的英文描述
Our original F140 kit, has a very broad reactivity to peptide epitopes and in addition, also has a small population of antibodies that recognize Pichia glycosylation epitopes. In cases where the recombinant protein product is also glycosylated, there is potential for some cross reactivity that can result in either an over-estimation of true HCP or indeterminate HCP concentrations, due to the lack of sample dilutional linearity.
The antibody used in this kit is the same polyclonal antibody that is used in the F140 kit, except that it has been subjected to an additional affinity adsorption step to remove antibodies to glycosylation epitopes and is much more specific than the F140, Pichia pastoris HCP ELISA kit.

Pichia pastoris 2nd Generation HCP ELISA kit 的使用步驟規(guī)則
The Pichia pastoris assay is a two-site immunoenzymetric assay. Samples containing Pichia pastoris HCPs are reacted in microtiter strips coated with an affinity purified capture antibody. A second horseradish peroxidase (HRP) enzyme labeled anti-Pichia pastoris antibody is reacted simultaneously resulting in the formation of a sandwich complex of solid phase antibody-HCP-enzyme labeled antibody. The microtiter strips are washed to remove any unbound reactants. The substrate, tetramethyl benzidine (TMB) is then reacted. The amount of hydrolyzed substrate is read on a microtiter plate reader and is directly proportional to the concentration of Pichia pastoris HCPs present.

畢赤酵母第二代 HCP 試劑盒的保存和穩(wěn)定性
1 All reagents should be stored at 2℃ to 8C℃for stability until the expiration date printed.
2 Reconstituted wash solution is stable until the expiration date of the kit.

Pichia pastoris 2nd Generation HCP ELISA kit的使用注意事項(xiàng)
1 只用于研究或制造。
2 停止反應(yīng)試劑是0.5N 硫酸。避免接觸眼睛，皮膚，和服裝。在用本試劑盒的試劑濃度，其他沒(méi)有被認(rèn)為是有害的。
3 本試劑盒只能由合格的技術(shù)人員使用。
 

Cygnus——生物生產(chǎn)宿主細(xì)胞殘留檢測(cè)

生物制品生產(chǎn)過(guò)程中存在許多影響產(chǎn)品質(zhì)量的殘留物，諸如特殊重組表達(dá)系統(tǒng)中宿主細(xì)胞蛋白（Host Cell Protein, HCP）的殘留以及生物制品加工過(guò)程中培養(yǎng)物殘留的污染物（Bioprocess Contaminant, BC）。Cygnus technologies, Inc.（賽納斯科技公司）是一家專為疫苗生產(chǎn)企業(yè)、基因工程藥企、研發(fā)部門及QA部門提供宿主細(xì)胞蛋白殘留檢測(cè)和生物工藝污染物檢測(cè)產(chǎn)品的世界著名的美國(guó)公司。該公司提供了種類廣泛而靈敏度極高的一系列用于檢測(cè)生物工程殘留物的產(chǎn)品，在尋求最佳純化效果和日常質(zhì)量控制過(guò)程中使用美國(guó)Cygnus公司的產(chǎn)品可以很方便地得到理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。?

1）CM015：CHO-CM HCP ELISA Assay

簡(jiǎn)介：CHO細(xì)胞具有永生性，可以傳代百代以上，是目前生物工程上廣泛培養(yǎng)的細(xì)胞。CHO細(xì)胞在基因工程使用中有很大的優(yōu)點(diǎn)，該細(xì)胞屬于成纖維細(xì)胞(fibroblast)，是一種非分泌型細(xì)胞，它本身很少分泌CHO內(nèi)源蛋白，因而檢測(cè)起來(lái)很困難。本試劑盒使用的抗體來(lái)自無(wú)蛋白成分的條件培養(yǎng)基，優(yōu)化了生產(chǎn)程序，最大限度地減少了污染物的存在，其靈敏度為200pg/mL。

2）F140：Pichia pastoris?HCP ELISA Kit

簡(jiǎn)介：畢赤酵母作為真核細(xì)胞表達(dá)體系，已經(jīng)被用來(lái)生產(chǎn)乙肝疫苗，對(duì)于疫苗生產(chǎn)企業(yè)來(lái)說(shuō)，疫苗的檢測(cè)和上市都極為嚴(yán)格，本試劑盒專為檢測(cè)畢赤酵母宿主蛋白，靈敏度達(dá)到0.3ng/mL。

3）F400：Protein A ELISA kit

簡(jiǎn)介：Protein A由于和IgG的高親和力，常被用來(lái)純化重組蛋白類藥物，殘留的Protein A成為藥物臨床使用的一道屏障，檢測(cè)Protein A成為必要，新一代的Protein A ELISA kit（F400）較F050有很多改進(jìn)，能夠檢測(cè)任何非天然的、經(jīng)過(guò)修飾的Protein A。該試劑盒的靈敏度為50pg/mL。

4）F410：E.coli?HCP ELISA Kit

簡(jiǎn)介： 眾多研究者都將大腸桿菌作為原核表達(dá)最常用的細(xì)菌，但同時(shí)大腸桿菌自身也分泌許多蛋白，該試劑盒使用能夠檢測(cè)數(shù)百種大腸桿菌宿主蛋白的多抗，能夠檢測(cè)在生產(chǎn)當(dāng)中宿主蛋白的存在，經(jīng)過(guò)測(cè)試該試劑盒的靈敏度達(dá)到0.2ng/mL。

5）F550:?CHO HCP ELISA kit,?3G

簡(jiǎn)介：第三代CHO細(xì)胞宿主蛋白檢測(cè)試劑盒，較前兩代來(lái)說(shuō)，有了更多的改進(jìn)，使用了新的抗體對(duì)，比原先的兩代產(chǎn)品更加靈敏，同時(shí)受樣本中的干擾物質(zhì)的影響也是最小，該試劑盒已經(jīng)經(jīng)過(guò)大量的藥品和樣本實(shí)驗(yàn)，為檢測(cè)CHO細(xì)胞宿主蛋白的通用Elisa試劑盒。