產(chǎn)品英文名稱：Pichia pastoris 2nd Generation HCP ELISA kit
產(chǎn)品中文名稱：畢赤酵母第二代 HCP 試劑盒

Pichia pastoris 2nd Generation HCP ELISA kit 的應(yīng)用
本試劑盒是用于確定在畢赤酵母中的重組表達的宿主細胞生產(chǎn)的產(chǎn)品的畢赤酵母蛋白污染的存在。Cygnus賣畢赤酵母HCP檢測的兩種ELISA試劑盒。原盒F140，有一個非常廣泛的反應(yīng)性的肽表位，此外，還有一個小群體的抗體識別的抗原表位的畢赤酵母的糖基化。在重組蛋白產(chǎn)品同時糖化，有交叉反應(yīng)情況下，可以導(dǎo)致在真正的hcp或不定的hcp濃度由于樣本稀釋線性估計潛在的缺乏。用F640試劑盒用的抗體是與F140試劑盒相同的多克隆抗體是除了已經(jīng)承受額外的親和吸附去除抗體的糖基化表位。該試劑盒是用于研究和制造使用，不用于人類或動物的診斷應(yīng)用。

畢赤酵母第二代 HCP 試劑盒的英文描述
Our original F140 kit, has a very broad reactivity to peptide epitopes and in addition, also has a small population of antibodies that recognize Pichia glycosylation epitopes. In cases where the recombinant protein product is also glycosylated, there is potential for some cross reactivity that can result in either an over-estimation of true HCP or indeterminate HCP concentrations, due to the lack of sample dilutional linearity.
The antibody used in this kit is the same polyclonal antibody that is used in the F140 kit, except that it has been subjected to an additional affinity adsorption step to remove antibodies to glycosylation epitopes and is much more specific than the F140, Pichia pastoris HCP ELISA kit.

Pichia pastoris 2nd Generation HCP ELISA kit 的使用步驟規(guī)則
The Pichia pastoris assay is a two-site immunoenzymetric assay. Samples containing Pichia pastoris HCPs are reacted in microtiter strips coated with an affinity purified capture antibody. A second horseradish peroxidase (HRP) enzyme labeled anti-Pichia pastoris antibody is reacted simultaneously resulting in the formation of a sandwich complex of solid phase antibody-HCP-enzyme labeled antibody. The microtiter strips are washed to remove any unbound reactants. The substrate, tetramethyl benzidine (TMB) is then reacted. The amount of hydrolyzed substrate is read on a microtiter plate reader and is directly proportional to the concentration of Pichia pastoris HCPs present.

畢赤酵母第二代 HCP 試劑盒的保存和穩(wěn)定性
1 All reagents should be stored at 2℃ to 8C℃for stability until the expiration date printed.
2 Reconstituted wash solution is stable until the expiration date of the kit.

Pichia pastoris 2nd Generation HCP ELISA kit的使用注意事項
1 只用于研究或制造。
2 停止反應(yīng)試劑是0.5N 硫酸。避免接觸眼睛，皮膚，和服裝。在用本試劑盒的試劑濃度，其他沒有被認為是有害的。
3 本試劑盒只能由合格的技術(shù)人員使用。
 

Cygnus——生物生產(chǎn)宿主細胞殘留檢測

生物制品生產(chǎn)過程中存在許多影響產(chǎn)品質(zhì)量的殘留物，諸如特殊重組表達系統(tǒng)中宿主細胞蛋白（Host Cell Protein, HCP）的殘留以及生物制品加工過程中培養(yǎng)物殘留的污染物（Bioprocess Contaminant, BC）。Cygnus technologies, Inc.（賽納斯科技公司）是一家專為疫苗生產(chǎn)企業(yè)、基因工程藥企、研發(fā)部門及QA部門提供宿主細胞蛋白殘留檢測和生物工藝污染物檢測產(chǎn)品的世界著名的美國公司。該公司提供了種類廣泛而靈敏度極高的一系列用于檢測生物工程殘留物的產(chǎn)品，在尋求最佳純化效果和日常質(zhì)量控制過程中使用美國Cygnus公司的產(chǎn)品可以很方便地得到理想的實驗結(jié)果。?

1）CM015：CHO-CM HCP ELISA Assay

簡介：CHO細胞具有永生性，可以傳代百代以上，是目前生物工程上廣泛培養(yǎng)的細胞。CHO細胞在基因工程使用中有很大的優(yōu)點，該細胞屬于成纖維細胞(fibroblast)，是一種非分泌型細胞，它本身很少分泌CHO內(nèi)源蛋白，因而檢測起來很困難。本試劑盒使用的抗體來自無蛋白成分的條件培養(yǎng)基，優(yōu)化了生產(chǎn)程序，最大限度地減少了污染物的存在，其靈敏度為200pg/mL。

2）F140：Pichia pastoris?HCP ELISA Kit

簡介：畢赤酵母作為真核細胞表達體系，已經(jīng)被用來生產(chǎn)乙肝疫苗，對于疫苗生產(chǎn)企業(yè)來說，疫苗的檢測和上市都極為嚴格，本試劑盒專為檢測畢赤酵母宿主蛋白，靈敏度達到0.3ng/mL。

3）F400：Protein A ELISA kit

簡介：Protein A由于和IgG的高親和力，常被用來純化重組蛋白類藥物，殘留的Protein A成為藥物臨床使用的一道屏障，檢測Protein A成為必要，新一代的Protein A ELISA kit（F400）較F050有很多改進，能夠檢測任何非天然的、經(jīng)過修飾的Protein A。該試劑盒的靈敏度為50pg/mL。

4）F410：E.coli?HCP ELISA Kit

簡介： 眾多研究者都將大腸桿菌作為原核表達最常用的細菌，但同時大腸桿菌自身也分泌許多蛋白，該試劑盒使用能夠檢測數(shù)百種大腸桿菌宿主蛋白的多抗，能夠檢測在生產(chǎn)當(dāng)中宿主蛋白的存在，經(jīng)過測試該試劑盒的靈敏度達到0.2ng/mL。

5）F550:?CHO HCP ELISA kit,?3G

簡介：第三代CHO細胞宿主蛋白檢測試劑盒，較前兩代來說，有了更多的改進，使用了新的抗體對，比原先的兩代產(chǎn)品更加靈敏，同時受樣本中的干擾物質(zhì)的影響也是最小，該試劑盒已經(jīng)經(jīng)過大量的藥品和樣本實驗，為檢測CHO細胞宿主蛋白的通用Elisa試劑盒。