Total Glutathione Quantification Kit
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產(chǎn)品英文名稱:Total Glutathione Quantification Kit
產(chǎn)品中文名稱:總谷胱甘肽測定試劑盒
Total Glutathione Quantification Kit 產(chǎn)品特性
比色微板法檢測
高靈敏的DTNB循環(huán)檢測
檢測范圍從1 μg-100 μg
Total Glutathione Quantification Kit 概述
谷胱甘肽(GSH)是動物組織,植物組織,細(xì)菌和酵母內(nèi)最為豐富的巰基(SH)化合物。GSH具有多種功能,如抵御活性氧和維持蛋白巰基等。在這些反應(yīng)中,GSH轉(zhuǎn)變?yōu)镚SSG(二硫代谷胱甘肽: 谷胱甘肽的氧化型)。由于GSSG會被谷胱甘肽還原酶酶促還原,因此GSH是機(jī)體內(nèi)的主要存在形式。
DTNB(5,5’-二硫基-雙(2-硝基苯甲酸)),一種Ellman試劑,可以用來檢測巰基化合物。1985年,Dr.M.E.Anderson建立了利用谷胱甘肽在DTNB和谷胱甘肽還原酶作用下循環(huán)反應(yīng)來檢測谷胱甘肽含量的高靈敏度的方法。DTNB和谷胱甘肽(GSH)反應(yīng),生成2-nitro-5-thiobenzoic acid(2-硝基-5-硫代苯甲酸)以及GSSG。由于2-硝基-5-硫代苯甲酸為一種黃色產(chǎn)物,通過測量其在412 nm處的吸光度就能確定樣品中GSH的濃度。GSSG在谷胱甘肽還原酶作用下生成GSH,然后再和DTNB反應(yīng)再次生成2-硝基-5-硫代苯甲酸。因此,這種循環(huán)反應(yīng)使得總谷胱甘肽含量的檢測靈敏度大大加強(qiáng)了。
Total Glutathione Quantification Kit 試劑盒內(nèi)容
- Substrate (DTNB)……….…..2小管
- Enzyme Solution…………….50 μl × 1小管
- Coenzyme (冷凍干燥).……...2小管
- Standard GSH (冷凍干燥)..…1小管
- Buffer solution…………...…..50 ml × 1瓶
Total Glutathione Quantification Kit 貯藏條件
未開封的試劑盒可在0-5℃保存1年。Substrate Working Solution、Coenzyme working solution 和GSH Standard Solution可在-20℃保存2個月,enzyme solution可在4℃下保存2個月(無需凍融)。
Total Glutathione Quantification Kit 注意事項
1.請在室溫下使用試劑盒中的試劑。
2.建議每組樣品設(shè)定3個復(fù)孔,以便得到更準(zhǔn)確的數(shù)據(jù)。
3.由于加入Substrate working solution之后會立刻產(chǎn)生顯色反應(yīng), 因此盡量使用多通道移液器以減少各孔之間的誤差。
4.如不知道樣品中總谷胱甘肽含量的濃度范圍, 就請準(zhǔn)備多個濃度梯度的樣品溶液。
5.本試劑盒不適合測定GSSG。
6.試劑盒中有帶鋁蓋的玻璃管,請小心拿取。
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